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貨號：CW2105S

產品名稱：CW2105S 無內毒素質粒中提試劑盒（5-15mL）盒（EndoFree Plasmid Midi Kit）

品牌：康為世紀

處理菌液體積：5–15 mL（高拷貝質粒）

規格：50 preps（50 次提?。?/span>

質粒產量：最高 100 μg / 次

質粒純度：OD260/280=1.8–1.9；OD260/230≥2.0

內毒素殘留：≤0.1 EU/μg（轉染級標準）

核心技術：堿裂解法、硅基質膜吸附、Endo-Free Buffer ER 去內毒素

特色指示劑：CWBlue（裂解 / 中和顏色指示，避免操作失誤）

適用質粒：高拷貝、低拷貝、粘粒北京市公共資源交易服務平臺

應用場景：細胞轉染（293/CHO）、AAV/LV 包裝、體外轉錄、酶切、測序、PCR

儲存條件：室溫 15–30℃；RNase A 2–8℃保存，有效期 12 個月

操作時長：約 50 min / 批次

試劑盒組分（50 次裝）

Buffer P1：30 mL（含 RNase A，重懸菌體）

Buffer P2：30 mL（裂解液，SDS+NaOH）

Buffer E3：30 mL（中和液，含 CWBlue 指示劑）

Buffer PS：15 mL（去內毒素緩沖液）

Buffer PW（濃縮）：10 mL（漂洗緩沖液，需稀釋）

Endo-Free Buffer EB：10 mL（無內毒素洗脫液，pH8.5）

離心吸附柱 DQ：50 個

收集管：50 個

RNase A（10 mg/mL）：600 μL

產品核心優勢

轉染級無內毒素，保障高效轉染

專用 Endo-Free Buffer ER 高效去除內毒素，殘留≤0.1 EU/μg，避免內毒素引發細胞應激、轉染效率下降，適配 HEK293、CHO、Expi293 等高要求轉染場景。

高純度高得率，批次穩定

硅基質膜特異性吸附質粒，去除基因組 DNA、蛋白、多糖；CWBlue 顏色指示（裂解藍→中和無色），規避操作誤差，純度穩定（OD260/280=1.8–1.9），得率可達 100 μg / 次。

操作簡便快速，無需酚氯仿

全程離心操作，50 min 完成 50 次提取；無酚氯仿、無有毒試劑，安全環保，適配實驗室常規離心機，無需特殊設備。

通用性強，適配多場景

適配 5–15 mL 高 / 低拷貝菌液，提取質?？芍苯佑糜诩毎D染、病毒包裝、體外轉錄、酶切、測序、PCR，滿足科研與小規模量產需求。

高性價比，現貨供應

國產替代進口（如 Qiagen EndoFree），價格更優、批次穩定；華雅思創生物現貨直發，。

標準操作流程（50 min）

菌體收集：取 5–15 mL 過夜菌液，8000 g 離心 3 min，棄上清。

重懸裂解：加 250 μL Buffer P1（含 RNase A）重懸；加 250 μL Buffer P2，輕柔顛倒混勻（溶液變藍），室溫靜置 5 min。

中和去蛋白：加 350 μL Buffer E3，顛倒混勻至藍色消失，室溫靜置 5 min；12000 g 離心 10 min，取上清。

柱吸附：上清轉移至吸附柱 DQ，12000 g 離心 1 min，棄廢液。

去內毒素：加 500 μL Buffer PS，12000 g 離心 1 min，棄廢液。

漂洗：加 750 μL 稀釋后 Buffer PW，12000 g 離心 1 min，棄廢液；空管離心 2 min，去除殘留乙醇。

洗脫：吸附柱轉移至新離心管，加 50–100 μL Endo-Free Buffer EB，室溫靜置 2 min，12000 g 離心 1 min，即得無內毒素質粒。

保存：質粒 - 20℃分裝保存，避免反復凍融。

常見問題解答

內毒素殘留是否影響轉染？

是。內毒素 > 0.1 EU/μg 會激活 TLR4 通路，導致細胞凋亡、轉染效率驟降；本試劑盒殘留≤0.1 EU/μg，適配轉染與病毒包裝。

CWBlue 指示劑作用？

裂解后溶液變藍（堿性），中和后藍色消失（中性），直觀判斷裂解 / 中和是否充分，避免基因組 DNA 污染與得率下降。

低拷貝菌液適用嗎？

適用。低拷貝建議 15 mL 菌液，得率約 30–50 μg，純度與內毒素標準不變。

可用于病毒包裝質粒提取嗎？

適配。無內毒素、高純度質?？娠@著提升 AAV/LV 包裝效率與病毒滴度。

保質期與儲存注意？

室溫 15–30℃可存 12 個月；RNase A 需 2–8℃保存，避免失效；Buffer PW 濃縮液需按比例稀釋后使用。

CW2105S 無內毒素質粒中提試劑盒（5-15mL）是國產轉染級質粒提取，以高純度、低內毒素、高得率、操作簡便、性價比高為核心優勢，適配細胞轉染、病毒包裝、體外轉錄等高要求實驗。50 次規格適配實驗室長期使用與小規模量產，華雅思創生物原裝現貨、致力為分子生物學實驗提供穩定可靠的核酸提取解決方案。